Termociclador de PCR en tiempo real Applied Biosystems™ QuantStudio™ 3
La PCR cuantitativa (en inglés, quantitative polymerase chain reaction; qPCR) o PCR en tiempo real (en inglés real time PCR) es una variante de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultáneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificación de ácido desoxirribonucleico (ADN). Para ello emplea, al igual que la PCR convencional, un molde de ADN, al menos un par de cebadores específicos, dNTPs, un tampón de reacción adecuado y una ADN polimerasa termoestable. A dicha mezcla se le adiciona una sustancia marcada con un fluoróforo que permita medir la tasa de generación de uno o más productos específicos en un termociclador provisto de sensores de fluorescencia, tras excitar el fluoróforo a la longitud de onda apropiada. Dicha medición se realiza tras cada ciclo de amplificación, y es por esto que se le denomina PCR en tiempo real. En muchos casos, el molde que se emplea para la PCR cuantitativa no es ADN desde el principio, sino que puede ser ADN complementario (ADNc), de hebra simple, obtenido por retrotranscripción de ácido ribonucleico (ARN); en este caso, la técnica es una RT-PCR cuantitativa o en tiempo real, o RT-Q-PCR.
La PCR cuantitativa se utiliza para el diagnóstico de enfermedades, tales como enfermedades infecciosas, cáncer y anormalidades genéticas. En el campo de la investigación, esta técnica, se utiliza principalmente para mediciones cuantitativas de la transcripción y expresión génica, determinando cómo cambia la expresión de un gen concreto a lo largo del tiempo o en determinadas condiciones como la administración de un fármaco, y analizando la respuesta de las células de un tejido al mismo, además del progreso de la diferenciación celular o respuestas frente a cambios en las condiciones ambientales. También se utiliza para determinar la homocigosis o heterocigosis de un individuo para un determinado gen.
La Unidad de Investigación del HGT cuenta con un Termociclador de Applied Biosystems™ qPCR QuantStudio® 3, que permite establecer perfiles de expresión genética, expresión de microRNAs, detección de genes, mutaciones y genotipado de polimorfismos genéticos o SNPs. Es compatible con sistemas de detección de fluoróforo SYBR Green y ensayos basados en sondas Taqman.
- Las características del sistema QuantStudio® 3 incluyen:
- Software del instrumento simplificado con pantalla táctil interactiva para una mayor facilidad de uso
- Tecnología OptiFlex® probada (4 canales acoplados con LED blanco) para obtener resultados fiables
- La opción de software seguro basado en una nube (Thermo Fisher Cloud) proporciona mayor accesibilidad y opciones de almacenamiento
- Gestión de cuentas de usuario, flujo de trabajo bloqueado y funciones de pausa para un mayor control de los experimentos
- Formato de 96 pocillos de 0,2 mL o formato de 96 pocillos de 0,1 mL
Este aparato se obtuvo gracias a la concesión de financiación a través de las “Ayudas para la adquisición de equipamiento científico-técnico del año 2019, correspondiente al subprograma estatal de infraestructuras de investigación y equipamiento científico-técnico (Plan Estatal I+D+I 2017-2020)”, siendo la financiación aportada por el Ministerio de Ciencia, Innovación y Universidades (80%) y el SESCAM (20%).